福建兽药残留ELISA***盒厂家服务周到 北京中检维康公司

Elisa***盒注意事项

Elisa***盒解冻与存放：-20℃取出后建议放入2～8℃冰箱中解冻约，每隔一段时间轻轻摇晃均匀，不可直接放入温度较高处解冻，避免因温度改变太大，造成蛋白质凝集而出现沉淀，其质量下降。若短期无法用完一瓶，建议无菌分装,再放回冷冻，避免反复冻融。4℃长时间保存后的变性脂蛋白及纤维蛋白，形成絮状物质变差。

Elisa***盒有哪些需要注意的？

1. 跟着病况的进展或由其他因素影响，某些在机体内的含量发作大幅动摇，因此有必要对标本进行预处理。间接法测定中，标本恰当稀释还可下降非特异性反响。

2. 加样一般运用加液器，在ELISA***盒中一般有4次加样：加标本、加酶结合物、加底物和加间断液。加标本时有必要每份标本运用一支移液器吸嘴，避免交叉污染。加酶结合物、底物和间断液时则不需更换吸嘴。

3.在成批手艺检测中，还应留神操作时差的影响。加样及混匀时间的差异，使抗原反响和酶促反响时间不一致，对竞争法及定量检测影响很大，不留神可能会导致过错效果或定量不准。

Elisa***盒的操作注意事项

洗刷是ELISA***盒操作过程中决议实验胜败的一个关键步骤。目的是除掉未结合的反响物，间断抗原***反响，除掉标本中与反响无关的成分、游离的酶标物以及反响过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。

断定效果须运用Elisa***盒测读仪，比色法判读可选择单波长或双波长，根据反响液颜色的不同选用不同波长的滤光片，以空白孔校零测定反响孔的吸光度值。具有杰出的重复性。

Elisa***盒——Elisa实验常见问题及解决方案

显色淡，灵敏度偏低

1  ***盒未充分平衡 ***盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖，于室温平衡至少20分钟，确保所有***已平衡至室温（约25℃）

2  样品不适合做ELISA检测 样品一般选择培养上清、血浆。其他样品形式可能不适合做ELISA检测或者需要优化检测的条件（例如稀释液的成分）

3  酶标板在贮存或洗后拍干时过分干燥 防止板过于干燥

4  包被遭到*** 操作温和，移液枪不能碰到孔底

5  样本和孵育条件不合适 按照说明书条件，建议孵育过程中全程振荡孵育。

6  洗涤浸泡时间过长 按照说明书操作。勿人为增加浸泡时间；

7  偶联HRP***污染 弃去***，重新配置

8  错误的稀释偶联HRP*** 弃去***，重新配置

9  TMB底物孵育时间过短，因非人为因素影响，需要优化孵育时间 确定合适的孵育时间：人为判定-高浓度的标准品出现深蓝色；S4-5有淡蓝色；机器判定620 nm波长下测定OD值达到0.6-0.65

10  样本浓度过高或存在基质效应 建议做不同稀释倍数，确认样本稀释倍数。

11  滤光片设置有问题或者波长选择不对 确认仪器设置及选择正确的波长检测。

12  酶标板不适合做ELISA 不能使用细胞培养板，建议使用ELISA高吸附力板子。