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发布时间:2022-05-04 11:45:48
亲和柱的概念
亲和柱/亲和膜,都是医类分离器.如除内亲和柱,以Sepharose4B为基质,配基为组氨酸,壳聚糖,季铵盐等
实验采用亲和柱-荧光光度法快速测定了鲜牛乳及乳粉中M1.试样经过离心、脱脂、过滤后,滤液经过键合有M1特殊的亲和柱净化,此对M1具有专一的识别能力,M1键合在氯***、等亲和柱分离柱中的上.将亲和柱上杂质除去,通过分离柱洗脱,加入溶液衍生,以提高测定灵敏度.衍生化后的洗脱液于荧光光度计中测定M1,检测低限为0.01μg/kg,在0.1-1.0μg/kg范围内,回收率为89.6%-96.1%,变异系数为0.52%-5.8%,分析一个样品的时间小于30min.,分析过程中不使用M1标准物质.用FAPAS的参考标样证实了检测方法、分析仪器和操作人员得到的结果是准确可靠的。
亲和柱——亲和层析原理
亲和层析原理:利用生物分子之间的专一性识别性或特定的相互作用的分离技术称为亲和分离技术。在该技术中,亲和分离过程是通过引入亲和配基得以实现的。所谓亲和配基,是指具有对生物分子专一识别性或特异相互作用的物质。将亲和配基固定在不同的介质上,可得到不同的亲合分离技术,如固定在层析介质上,达到专一性层析分离的技术称为亲和层析技术。将亲和配基接在分离膜上,得到亲和膜分离技术。
亲和柱——特点介绍
亲和柱,相对于多功能净化柱特异性强,灵敏度较高;多功能净化柱就相对使用方便,无需洗脱,比较适合简单样品的样品纯化。
亲和柱主要特点如下:
? 可用于***,呕吐,付马,赭曲霉和玉米赤霉烯酮的检测
亲和柱亲和层析过程中的注意事项
1、上样
亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短,通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件,包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度等,以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。
2、洗脱
亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。亲和层析的洗脱方法可以分为两种:特异性洗脱和非特异性洗脱。
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