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发布时间:2022-08-16 03:22:53
亲和柱介绍
生物分子之间的亲和识别包括***和抗原、酶和底物和受体等之间的亲合作用,这些亲和作用属于生物专一性识别;此外,某些物质和生物大分子之间还有一些特异性作用,如染料和某些酶(特别是脱氢酶和激酶等),植物凝集素和糖蛋白,金属离子和蛋白质表面的组氨酸等之间的作用,都可以应用于亲和分离过程。
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亲和柱的测定原理
亲和柱,吸附力高柱容量大,适合于和HPLC、LC-MS及DON酶免分析***盒结合使用,定量检测DON。适用于谷物、饲料等样本中的DON净化处理,提高了样品的纯度,纯化后的提取液可用不同的分析方法测定。
测定的基础是抗原反应,抗呕吐***(DON)的连接在柱内凝胶介质上,样品中的DON经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢通过DON亲和柱,在亲和柱内,DON与结合,洗涤液通过亲和柱除去未被结合的杂质。之后洗脱DON,然后进行相关分析。
亲和柱亲和层析的基本原理
亲和层析是一种吸附层析,抗原(或)和相应的(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。
所以将抗原(或)固相化后,就可以使存在液相中的相应(或抗原)选择性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分离提纯的目的。此法具有有效、快速、简便等优点。
亲和柱——亲和层析的用途
简单来说,亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。
亲和层析常见的用途是纯化重组蛋白。亲和层析是从粗混合物中纯化蛋白质或核酸的较佳选择。如果蛋白质的分子量,疏水性,电荷等未知,亲和色谱法仍可适用于这种情况。一个典型例子是尝试分离具有特定活性的酶时,可以用与所选底物相似或相同的连接配体构建亲和柱。
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